分析型液相色譜(HPLC)是一種常用的分析技術,它可以用于定性和定量分析各種化合物。以下是常見的HPLC分析方法:
反相色譜法(RP-HPLC):在反相色譜柱上,采用非極性或低極性固定相和有機溶劑為流動相進行分離。適用于具有親水性的化合物,如蛋白質(zhì)、藥物、天然產(chǎn)物等。
正相色譜法(NP-HPLC):在正相色譜柱上,采用極性固定相和無機溶劑為流動相進行分離。適用于具有疏水性的化合物。
離子交換色譜法(IEC):利用帶電離子交換柱將樣品中的離子與固定陰/陽離子進行吸附和解吸作用來進行分離。適用于對電荷狀態(tài)敏感的化合物。
大孔徑凝膠過濾色譜法(GPC/GFC):通過使用大孔徑凝膠過濾柱將樣品按照大小排列而實現(xiàn)其分離純化。適用于聚合物、蛋白質(zhì)等高分子化合物。
手性色譜法:使用手性固定相將樣品中的手性化合物分離。適用于分析和鑒定手性藥物、天然產(chǎn)物等。
親和色譜法(AFF):利用一種特定的親和劑與目標化合物發(fā)生特異性相互作用,實現(xiàn)化合物的選擇性捕獲和純化。
氣相色譜聯(lián)用液相色譜(GC-LC):通過將氣相色譜儀與液相色譜儀聯(lián)接在一起,可實現(xiàn)對復雜樣品的更加全面的分析。
這些方法可以根據(jù)具體需要進行優(yōu)化,并結(jié)合不同檢測器如紫外-可見光檢測器、熒光檢測器、質(zhì)譜儀等來提高靈敏度和選擇性。同時,還可以調(diào)整流動相組成、柱溫以及梯度洗脫程序等條件以達到最佳分離效果。